HMGB1多克隆抗體,該抗體識(shí)別人、兔、牛、豬、大鼠和小鼠HMGB1,并且還識(shí)別HMGB2。蛋白質(zhì)免疫印跡(WB)分析證實(shí)抗體的特異性。使用純化的豬胸腺HMGB1作為免疫原。通過(guò)鹽沉淀從蛋黃中純化抗體。
多個(gè)不同克隆B細(xì)胞針對(duì)多種抗原表位所產(chǎn)生的多種抗體的混合物稱為多克隆抗體。也稱第一代人工抗體,如免疫血清。
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)可同時(shí)激活多種B細(xì)胞克隆,產(chǎn)生的抗體中會(huì)含有多種針對(duì)不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動(dòng)物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。
多克隆抗體的優(yōu)勢(shì)是:作用全面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來(lái)源廣泛、制備簡(jiǎn)單。其缺點(diǎn)是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。
將免疫原注射到宿主動(dòng)物體內(nèi)以產(chǎn)生多克隆抗體。動(dòng)物中的免疫反應(yīng)是由這種免疫原激活多個(gè)B細(xì)胞引起的,所有這些B細(xì)胞都針對(duì)免疫原上的特定表位。
大量具有不同互補(bǔ)位的抗體由此產(chǎn)生,因此對(duì)靶蛋白的親和力不同。免疫后,可以直接從血清(去除凝血蛋白和紅細(xì)胞的血液)中使用這些多克隆抗體,或者將它們純化以獲得不含其他血清蛋白的溶液。必須用抗原對(duì)新動(dòng)物進(jìn)行免疫以創(chuàng)建新批次,這意味著批次之間存在高度的可變性。