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ELISA試劑盒具體的操作方法介紹
   ELISA試劑盒具體的操作方法介紹
  ELISA試劑盒的特點(diǎn)是可以一同進(jìn)行許多標(biāo)本的檢測,并可在特定的比色計上迅速讀出成果。現(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測,包含加樣、洗刷、保溫、比色等進(jìn)程,對操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義。下面我們來看看關(guān)于它的操作方法!
  操作過程:
  1、確認(rèn)本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
  2、將倍比稀釋的規(guī)范品各0.1ml順次參加一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔參加。
  3、酶標(biāo)板加上蓋,37℃反響90分鐘。
  4、反響后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下,洗刷2次。
  5、將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響60分鐘。
  6、0.01MTBS或0.01MPBS洗刷3次,每次浸泡1分鐘左右。
  7、將準(zhǔn)備好的工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響30分鐘。
  8、按每孔0.1ml順次參加TMB顯色工作液,37℃避光反響,反響過程中,要常常的調(diào)查,當(dāng)肉眼可見規(guī)范品的前3-4孔有顯著的梯度藍(lán)色,后3-4孔不同不顯著時,即可參加停止液0.1ml/孔。(顯色反響長不要超越30分鐘)。
  9、根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。ELISA試劑盒用戶也能夠使用各種應(yīng)用軟件來核算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。
  注意以下事項(xiàng):
  1.試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi);
  2.仔細(xì)閱讀闡明書;
  4.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存;
  5.依據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量承認(rèn)所需試劑的量;
  6.準(zhǔn)備好全部實(shí)驗(yàn)額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;按說明書將所用ELISA試劑盒平衡至室溫,制作所需試劑。
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