TNF-α檢測試劑盒采用重組 Protein G包埋的96孔酶標(biāo)板以錨定多克隆抗體分子,試劑盒內(nèi)提供的HRP偶聯(lián)物直接與待測樣本內(nèi)競爭性的結(jié)合到酶標(biāo)板的抗體上。孵育并清洗后,結(jié)合到酶標(biāo)板上的HRP偶聯(lián)物數(shù)量可以很方便的通過HRP顯色底物等試劑在OD450nm處讀取。這樣OD450 nm的數(shù)值與樣本內(nèi)的含量呈負相關(guān)。
TNF-α檢測試劑盒影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的主要因素有哪些?
1)不*的洗滌會降低測定性,導(dǎo)致不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果。務(wù)必確保洗板機的正常工作,確保酶標(biāo)板各孔被充分洗滌卻不干燥。
2)不合理的移液操作會導(dǎo)致高CV值和不理想曲線。
3)在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的過程中,TNF-α檢測試劑盒不正確的移液方式會導(dǎo)致錯誤的稀釋,從而使錯誤的數(shù)值進入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,或者產(chǎn)生非線性曲線。確保移液器正常工作。每個孔中的液體體積不等可能就是移液器失靈或者槍頭使用不當(dāng)所致。
4)TNF-α檢測試劑盒在測定不同板中的樣品時,每一個板都對應(yīng)一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。技術(shù)錯誤或者不同的孵育情況,環(huán)境條件都會引起酶標(biāo)板之間產(chǎn)生不同結(jié)果。一條標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的樣品值必需是在相同環(huán)境下產(chǎn)生的,否則就是無效值。