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副流感病毒IgG/IgM ELISA檢測(cè)試劑盒

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：副流感1/2/3 IgG ELISA試劑盒

英文名稱： Parainfluenza 1/2/3 IgG ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

副流感病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒，此酶免試劑盒可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗體的體外定性和定量檢測(cè)。

【前言簡(jiǎn)介】

副流感病毒感染是一種通過空氣傳播并在各個(gè)地域都會(huì)出現(xiàn)的傳染病。副流感病毒在1歲大嬰兒中的血清學(xué)流行率為50%。副流感病毒的典型特征是頻繁的再感染,副流感病毒3的主要特征為：其潛伏期為2-6天。副流感病毒是副粘病毒的一個(gè)亞種。它和呼吸道合胞病毒(RSV)一起屬于呼吸道疾病的主要病毒性病原體，并且這種呼吸道感染會(huì)伴隨有嚴(yán)重的臨床癥狀。在成年人中，副流感病毒會(huì)引起嚴(yán)重的鼻咽炎。副流感病毒感染開始的癥狀表現(xiàn)為突然間的頭疼、肌肉疼痛和關(guān)節(jié)痛，接下來就出現(xiàn)38-39°C的高燒。如果下感染了下呼吸道，則又會(huì)出現(xiàn)氣管支氣管炎的癥狀：聲音嘶啞和干咳。在新生兒中，副流感病毒1會(huì)引起嚴(yán)重的肺炎，主要表現(xiàn)為高燒、黃萎病、呼吸困難和膿血痰。有時(shí)候還會(huì)出現(xiàn)腦膜炎的癥狀。在嬰兒和兒童中，副流感病毒2經(jīng)常會(huì)引起急性喉氣管支氣管炎和假格魯布。它首先表現(xiàn)為鼻黏膜炎的癥狀，之后出現(xiàn)呼吸困難、干咳和呼吸急促。副流感病毒3被認(rèn)為是引起肺炎和細(xì)支氣管炎的主要病原體。副流感病毒1/2/3分布于全球各個(gè)地方都存在，而副流感病毒4僅出現(xiàn)在美國(guó)。流感病毒1和流感病3的感染一年四季都會(huì)出現(xiàn)，而流感2和4的感染只是偶爾出現(xiàn)。副流感病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有血細(xì)胞凝集檢測(cè)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)和中和實(shí)驗(yàn)。新方法有IFA和ELISA，它們可以鑒別出病人血清中的IgG和IgA抗體。在鑒別診斷中，由于交叉反應(yīng)，我們必須進(jìn)行麻疹病毒、船運(yùn)熱病毒和猿病毒5等副粘病毒的檢測(cè)。

【檢測(cè)原理】

副流感病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒，此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。包被板上包被了抗原。用對(duì)人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗來檢測(cè)結(jié)合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應(yīng)后，所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測(cè)到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線得。

實(shí)驗(yàn)步驟

1) 加100µL標(biāo)準(zhǔn)品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中，在定性檢測(cè)中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。

2) 封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。

3) 移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。

5) 封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。

6) 移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時(shí)，如果有條件的話，可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。

7) 每孔加TMB底物液100µL。

8) 室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘。

9) 在每一微孔中加入100µL TMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)包被板以使試劑混合均勻。此時(shí)，顏色藍(lán)色變成黃色。

10) 加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)OD值。

【結(jié)果計(jì)算】

在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或用自動(dòng)生成的方法，以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為Y軸，濃度為X軸，繪制一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。用立體圖、4參數(shù)對(duì)數(shù)圖或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)圖都可獲得良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，用標(biāo)準(zhǔn)品的每一單值進(jìn)行計(jì)算（樣品結(jié)果明顯異常的值必須刪除掉，應(yīng)使用更加合理的單值）。樣品的濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得。一旦樣品稀釋了，就應(yīng)當(dāng)乘以相應(yīng)的稀釋因子。如果樣品所測(cè)得的濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明所述對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，并重新檢測(cè)。

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